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| 臨床送檢病料的采集、保存和運輸 |
| 2016-12-21 22:20:01 |
臨床送檢病料的采集、保存和運輸
時間：2016年12月21日 來源：陽光畜牧網(wǎng)
采集和運送樣品應符合《中華人民共和國動物防疫法》和《病死及死因不明動物處置辦法（試行）》的相關要求和規(guī)定�？茖W地采取檢測樣品是動物疫病診斷的基礎，也是診斷檢測工作的重要內(nèi)容。所采樣品的合格與否，直接影響實驗室診斷與檢測結果的準確性和可靠性。
1 樣品采集的一般原則
1.1 凡發(fā)現(xiàn)患畜禽有急性死亡時，如懷疑是炭疽，則不可隨意解剖，應采取患畜禽的血液，萬不得已時做局部解剖作脾臟觸片的顯微鏡檢查，只有在排除炭疽后方可進行剖檢，如懷疑是口蹄疫或高致病性禽流感等一類病原感染，則應送到相關參考實驗室進行確診。
1.2 用于病理學檢測的樣品，要求取組織新鮮，并及時固定。動物最好尚未死亡或死亡不久，剖檢時觀察有腫瘤增生的臟器（肝、脾為必取組織），在病變和正常組織交界處取材，所取組織塊不要太大，厚度不超過1cm，并立即浸入10% 的福爾馬林中固定液（市售甲醛溶液 10ml+水90ml）中保存，固定液不宜過少，固定液與組織比例為10:1以上。
1.3 采集病料的種類，應根據(jù)各種傳染病的特點采集相應的臟器、分泌物或排泄物。無法懷疑是什么傳染病時，應全面采取。
1.4 血液樣品采集后，可暫時放置于4℃冰箱保存，避免凍融溶血，分離出的血清可放置-20℃保存。病死畜禽應及時采集樣品，防止溫度過高引起腐敗。
1.5 樣品采集時，應盡量保持采樣過程處于潔凈環(huán)境，以防止樣品在采集過程中污染其它病原，干擾樣品的診斷檢測結果。
1.6 畜禽養(yǎng)殖場發(fā)生疫病后，應詳盡收集發(fā)病時間、發(fā)病動物數(shù)、同群動物數(shù)、死亡數(shù)、臨床治療情況、同群動物免疫情況等，以書面材料（填寫送檢表格）會同送檢樣品送達獸醫(yī)診斷實驗室。
1.7 樣品采集時應做好個人防護，防止人畜共患病的感染。樣品采集完畢后應及時清理現(xiàn)場，做好環(huán)境消毒和尸體的無害化處理。
2 臨床病料采集
2.1 全血樣品的采集
豬自耳靜脈或前腔靜脈，家禽自翅靜脈，其他家畜自頸靜脈采血。用注射器吸5％枸櫞酸鈉溶液0.5~1ml（0.1ml的5％枸櫞酸鈉溶液可抗1ml血液），注入滅菌離心管中。無菌采血5~10ml加入離心管混勻，蓋緊離心管蓋，做好標記。
2.2 血清樣品的采集
豬自耳靜脈或前腔靜脈，家禽自翅靜脈，其他家畜自頸靜脈無菌采血3~5ml置無菌試管中并擺成斜面，待血液充分凝固后可豎起。待血清充分析出后或離心分離血清后，用無菌注射器吸出血清注入滅菌離心管中，蓋緊離心管蓋，做好標記。
2.3 乳汁
取乳者手部用新潔爾滅清洗消毒，同時對被取乳動物的乳房、乳頭進行消毒，并把乳房附近的毛刷濕。棄去最初擠出的乳汁，然后采乳10~20ml注入滅菌試管或小瓶中，做好標記。
2.4 膿汁、水瘡液、水腫液和滲出液
破口的膿灶膿汁用滅菌棉拭子蘸取后，置入滅菌離心管中，剪去露出部分，蓋緊離心管蓋，做好標記，并密封低溫保存；未破口的膿灶用滅菌注射器吸出膿液后，注入滅菌容器中，做好標記，密封低溫保存。
2.5 鼻拭子、咽拭子、肛拭子
用滅菌棉拭子在患病畜禽鼻腔或咽喉部、肛處轉(zhuǎn)動至少3 圈，蘸取分泌物后，立即放入加有1mlPBS或生理鹽水的滅菌離心管中，剪去露出部分，蓋緊離心管蓋，做好標記，冷藏保存。
2.6 淋巴結、肝、脾、肺、腎
淋巴結可整個采取，其他器官可采病變明顯部位，無菌剪取一塊（根據(jù)不同部位，采取合適大小），分別置滅菌容器中，另取少許病料制觸片數(shù)張，并做好標記，一并送檢。
2.7 腸
選取適宜腸段約5-10cm，兩端結扎，在結扎線外端剪斷后，置玻璃容器或塑料袋中。
2.8 膽汁
采整個膽囊置一塑料袋中或以滅菌注射器吸取膽汁數(shù)毫升注入滅菌容器內(nèi)。
2.9 腦和脊髓
將腦和脊髓取出，浸入保存液中或?qū)㈩^部整個割下，用浸過3％石炭酸的紗布包裹后，裝入塑料袋內(nèi)。
2.10 小家畜、家禽的尸體和流產(chǎn)胎兒
用消毒液浸過的紗布包裹后，裝入塑料袋中整個送檢。
3 動物采血方法
3.1 雞的采血方法
3.1.1 翅靜脈采血
翅靜脈采血是常用的采血部位，翅靜脈在肘關節(jié)腹側(cè)的表面，清晰的暴露于皮膚之下，肉眼可見。采血時先拔去該部位的羽毛，抽血時，動作要輕柔緩慢，防止血管塌陷不回流，采血后略移動皮膚輕壓即可止血，由于雞的皮膚游離性大，采血后容易形成血腫，可適當延長采血后的止血時間。禽類翅靜脈采血方法最為常用。
3.1.2 心臟采血
此方法多用于進行尸體解剖前的血液采集檢驗。將雞仰臥保定，針頭從V型鎖骨前端刺人，或者在靠近心臟的胸側(cè)壁刺入；心臟采血過程中，如果操作不慎，易損傷肝臟，更有甚者，引起大出血死亡。
3.1.3 頸靜脈采血
雞的左側(cè)頸靜脈很細，通常采取右側(cè)頸靜脈采血。在皮膚上的一個無毛的溝正好是右側(cè)頸靜脈所處的位置。頸靜脈游離性大，皮膚松弛，采血后易于形成血腫。
3.2 豬的采血方法
3.2.1 前腔靜脈采血
豬前腔靜脈是由左右兩側(cè)的頸靜脈與腋靜脈至第一對肋骨間的胸骨柄匯合形成。采血時。針頭刺入部位在與耳根和對側(cè)肩胛骨上緣連線垂直線的胸骨端處，大豬采用站立保定，小豬可以采用仰臥保定法。左側(cè)靠近膈神經(jīng)，故以右側(cè)采血為宜。
3.2.2 耳靜脈采血
一般用于體格較大的豬。保定后，耳部消毒滅菌，以手指壓迫心端耳部靜脈。使血管怒張，針頭刺入血管后，動作要輕柔，采血要緩慢，否則血液不回流使靜脈癟陷。
4 樣品的保存
4.1 細菌類樣品 細菌類臨床樣品應盡快送檢，如不能盡快送檢，應保存在2~8℃保存短期保存不超過2天，盡量避免存放于冷凍環(huán)境下反復凍融。
4.2 病毒類樣品 應放置于-20℃保存短期保存1~2個月，長期保存于-70℃以下環(huán)境。
4.3 血清樣品 血清分離后，短時間內(nèi)放置于2~8℃保存短期保存不超過1周，長時間保存應放置于-20℃環(huán)境下。
4.4 動物尸體 應在死亡后6h內(nèi)剖檢取樣，如不能及時取樣，可將動物尸體放置于-20℃環(huán)境下暫時保存。
5 樣品運輸
5.1 供細菌檢驗、寄生蟲檢驗及血清學檢驗的樣品在4~20℃的環(huán)境下12h內(nèi)送達實驗室效果最好。
5.2 供病毒檢驗的冷藏處理樣品須在數(shù)小時內(nèi)送達實驗室，并在運輸過程中保持4℃左右。
5.3 血液樣品運輸時，應盡量避免溶血，以免干擾后續(xù)試驗，如進行血清學檢測時，可分離出血清后再單獨送檢血清，以避免運輸過程中溶血。
5.4 如樣品采集后不能短時間內(nèi)送到獸醫(yī)診斷實驗室，則需將樣品放置于-20℃冷凍數(shù)小時后再送檢，并且保證運輸過程中的低溫狀態(tài)（可將樣品放置于含有冰袋的保溫箱或泡沫箱中密封）。
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